畲药龙须藤,能改善类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的症状体征,明显降低关节疼痛肿胀,临床疗效确切,但其抗RA药效物质基础和作用机制尚不明确。
为了解决以上问题,本项目初期开发了畲药龙须藤总黄酮的提取以及分离富集工艺以及其药学用途。为了明确龙须藤的活性部位,首次通过动物模型筛选发现龙须藤乙酸乙酯部位具有显著的抗RA的活性,利用ELISA、Western-blot和RT-PCR等方法深入研究发现乙酸乙酯部位可能通过调节TLR4/NF-κB信号转导通路来发挥阻碍RA发生和发展的分子作用机制,接着利用柱层析、重结晶等简单的手段初步分离并鉴定了乙酸乙酯部位的11个化学成分,证实其以黄酮为主。
为了全面了解龙须藤的化学组成并筛选出活性单体,本项目后期放大了龙须藤提取规模,综合利用柱层析、制备液相、凝胶色谱等对石油醚以及乙酸乙酯部位进行系统的分离,又得到33个单体,包括3个新化合物。取大鼠原代滑膜细胞进行分离培养及鉴定,使用MTT染色法对分离得到的单体化合物进行抗RA活性评价,发现大部分化合物具有抑制细胞增殖的活性,然后选择含量相对丰富的黄酮类代表化合物二氢山柰酚,首次进行了其抗RA的初步机制研究,最后对具有自主知识产权的新苯并呋喃类化合物进行了进一步体内外活性验证以及深入的分子机制研究,为抗RA新药开发提供了全新的素材。
除了小分子化合物,本项目还对龙须藤的多糖提纯工艺进行优化,分析了龙须藤多糖中的单糖组成,在此基础上研究了龙须藤多糖对软骨细胞活性的影响,为龙须藤多糖的临床应用提供实验及理论依据。
为了探索龙须藤的开发利用前景,项目组还根据闽南名医黄金刚的验方发明了以龙须藤为主要成分的中药外用软膏剂--康美肤烧伤膏,进行了一系列工艺、有效性、安全性以及抗炎镇痛分子机制等临床前研究,以期扩大龙须藤的新用途。最后基于其明确的抗风湿关节炎疗效,与蓝佳堂生物医药有限公司合作开发了含有龙须藤提取物的医用凝胶,该创新大健康产品适用于缓解患者的风湿痹痛等症状,已成功推向市场,具有良好的实用价值和经济效益。
本项目共发表学术论文26篇,其中SCI源论文7篇,获得发明授权专利3项;多篇论文共被他引近百次,在国内外产生较大影响,对于增强福建民族畲药的社会知名度和认同感具有积极意义,也为各民族医药研究人员开展民族药的基础研究并探索其开发应用提供了借鉴。
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