1、项目来源与背景

　　本项目来源于宁德市医药卫生类科技计划项目（项目编号：20110001）。宫颈癌是造成目前世界妇女死亡的主要疾病之一，大量研究表明HPV感染是宫颈癌的主要流行因素, 90%以上宫颈癌是由HPV感染引起。HPV基因中E6和E7编码病毒癌蛋白,在细胞转化和维持转化组织恶性表型的过程中起着至关重要的作用。检测人乳头状瘤病毒信使核糖核酸(HPV　E6/E7 mRNA)表达量是实时监测基因转录状态的最好工具。本课题立足于临床，采用bDNA技术，通过对妇产科LCT标本检测高危HPV E6/E7 mRNA，E6/E7 DNA表达情况，并采用SPS软件对数据进行统计学分析，分析HPV E6/E7 mRNA、DNA检测在宫颈癌癌前病变筛查中的应用价值。为宫颈癌癌前病变筛查寻找准确及快速的筛查手段，为临床早期诊断及治疗提供依据。

　　2、技术原理及技能指标

　　HPV的检测已成为宫颈癌筛查、预防的重要手段之一。常规的HPV检测多针对HPV基因中的LI片段。Burk等指出L1片段在宫颈癌组织中由于病毒整合导致丢失或不表达，E6/E7片段在宫颈癌组织中则可以表达。E6/E7是HPV 致癌基因片段，这两种癌基因通过抑制P53和pRb从而干扰细胞周期调节，促进细胞无规则生长，但E6/E7基因无论HPV游离状态或者整合状态均存在，而只有当整合状态并转录表达时，E6/E7基因才发挥其致癌作用，因此检测HPV E6/E7 mRNA更合理。

　　HPV E6/E7mRNA 在宫颈组织中表现癌基因活性。已有文献报道E6/E7 mRNA水平与病变的严重程度相关。HPV E6/E7 mRNA及DNA，细胞学检查，阴道镜活检等作为本研究的主要判断指标。

　　3、技术的创造性与先进性

　　立足于临床，注重于宫颈癌的早期防范。采用bDNA技术，通过对妇产科LCT标本检测高危HPV E6/E7 mRNA，E6/E7 DNA表达情况，分析HPV E6/E7 mRNA、DNA检测在宫颈癌癌前病变筛查中的应用价值。bDNA技术应用于该检测具有一定的创造性和先进性。

　　4、技术成熟程度，适用范围和安全性

　　E6/E7是HPV 致癌基因片段，这两种癌基因通过抑制P53和pRb促进细胞无规则生长。 Burk等指出用于常规检测HPV的L1片段在宫颈癌组织中由于病毒整合导致丢失或不表达，E6/E7片段在宫颈癌组织中则可以表达。且E6/E7基因无论HPV游离状态或者整合状态均存在，因此，采用HPV E6/E7 DNA检测HPV DNA是否存在更合理。而HPV E6/E7 mRNA的检测则更能体现致癌基因是否发挥作用，从而提示病毒活动度及致癌风险。已有文献报道E6/E7 mRNA水平与病变的严重程度相关。

　　该技术适用于宫颈癌及癌前病变的筛查，特别是ASCUS患者的判断与分流。应用LCT标本进行检测，取材方法无创，患者接受程度高，安全有效。

　　5、应用情况及存在的问题

　　目前该检测已在我院及部分省级医院临床应用，效果良好。HPV E6/E7 mRNA检测作为宫颈癌筛查是一个新生事物，在国外开展也很短暂，在国内研究更少，临床大样本研究亟待进一步进行。分支DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA及DNA的方法较为新颖，尚未进行多中心、大范围临床研究，该技术的临床使用价值有待进一步研究。本课题将继续收集标本，着重收集畲族人群标本，当数量足够时开展畲族人群和汉族人群HPV E6/E7 mRNA及DNA的对比研究。进一步明确HPV E6/E7 mRNA及DNA的应用价值及种族特征。但畲族标本不易采集。且同时进行LCT检测需加大经费投入。若畲族标本数量过少，将无法进行HPV E6/E7 mRNA及DNA的种族特征分析。